微RNA-155在db/db小鼠体内的表达及其作用

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的探讨微RNA-155(miR-155)在C57BLKS/db(db/db)小鼠血清和肾脏中的表达及其在糖尿病肾病(DKD)发病机制中的作用。方法选取24只db/db小鼠,按随机数字表法分为6、8和10周龄组,每组8只,并设同期同周龄C57BL/6小鼠作为对照组。使用实时荧光定量PCR测定小鼠血清和肾组织miR-155的表达。通过免疫组化、实时荧光定量PCR和Western印迹测定小鼠肾组织中Ets-1、内皮型一氧化碳合酶(eNOS)和血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AGTR1)mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,6、8、10周龄db/db小鼠血清中miR-155的表达水平均明显增加(均P<0.01),10周龄时miR-155表达最明显(P<0.01);6、8和10周龄db/db小鼠肾组织中的miR-155的表达均明显上调(均P<0.01),10周龄时上调最明显(P<0.01)。免疫组化结果显示,Ets-1、eNOS和AGTR1均定位于肾小球内皮细胞;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,6、8和10周龄db/db小鼠肾组织中Ets-1、eNOS、AGTR1 mRNA的表达水平均下调(均P<0.05),10周龄时下调均最为明显。Western结果显示,与对照组相比,6周龄db/db小鼠肾组织Ets-1、eNOS和AGTR1表达均无明显变化,8周龄时eNOS蛋白表达水平下调(P<0.05),10周龄时AGTR1蛋白表达水平开始下调(P<0.05),Ets-1和eNOS蛋白表达水平均明显下调(均P<0.01)。结论 db/db小鼠血清、肾组织中miR-155的表达水平随着DKD的进展逐渐升高,而miR-155靶基因Ets-1、eNOS和AGTR1随着DKD的进展表达逐渐降低。miR-155可能通过抑制其靶基因Ets-1、eNOS和AGTR1,影响内皮细胞功能而参与DKD的发生和发展。

【关键词】 糖尿病肾病 微RNAs 一氧化氮合酶 MiRNA-155 肾小球内皮细胞

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